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Pappenheim-Färbung
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Prinzip
Bei der Panoptischen Färbung nach Pappenheim (benannt nach Arthur Pappenheim, 1870-1916) werden luftgetrocknete Blutausstriche mit mehreren Farblösungen behandelt. Diese Lösungen enthalten u. a. Stabilisatoren (Glycerin), Fixiermittel (Methanol), saure und basische Farbstoffe.
Basische Farbstoffe, z.B. Methylenblau, Brillantkresylblau bilden in wässriger Lösung aktive Farbstoffanteile mit positiver Ladung und färben Zellbestandteile, die negative Ladung tragen. Saure Farbstoffe wie Eosin und Säurefuchsin zerfallen in wässriger Lösung in aktive Farbstoffanteile mit negativer Ladung und färben Eiweißstrukturen positiver Ladung.
Reagenzien
- MAY-GRÜNWALDs Eosin-Methylenblau-Lösung
- GIEMSAs Azur-Eosin-Methylenblau-Stammlösung (1:20 verdünnte Stammlösung)
- Aqua dest. (Destilliertes Wasser), pH 7,2
Durchführung
- Luftgetrockneten Blutausstrich mit May-Grünwald-Lösung bedecken
- 3 min einwirken gelassen.
- Objektträger mit Aqua dest. abspülen und anschließend mit Aqua dest. bedecken
- 3 min einwirken lassen
- Ausstrich erneut mit Aqua dest. spülen
- Aqua dest. abkippen
- 15 min mit Giemsa-Gebrauchslösung färben
- Gut mit Aqua dest. abspülen
- Ausstriche schrägstehend an der Luft trocknen lassen
- Eventuelle Farbreste an der Unterseite des Objektträgers mit Ethanol entfernen
Ergebnis
Die verschiedenen zellulären und humoralen (flüssigen) Bestandteile des Blutes sind unter dem Lichtmikroskop in unterschiedlicher Einfärbung zu erkennen.
| Blutbestandteil | Einfärbung |
|---|---|
| Erythrozyten | rosa |
| Kerne der Leukozyten und kernhaltige Erythrozyten | rotviolett |
| Eosinophile Granula | ziegelrot bis rotbraun |
| Basophile Granula | dunkelviolett bis schwarz |
| Neutrophile Granula | hellviolett |
| Zytoplasma der Lymphozyten | hellblau |
| Monozytenplasma | graublau |
